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頂空氣相色譜系列講座(6)
點擊次數(shù):4056 更新時間:2013-03-04

頂空氣相色譜系列講座(6)   
苯類化合物的頂空色譜分析(6)



頂空色譜分析的條件實驗

l         色譜條件:選用毛細柱有利將鄰、對、間二甲苯得到*分離,中等偏弱極性的毛細色譜柱均可用,極性不同程序升溫也要相應(yīng)改變。如SE-54(25m×0.25mm×0.25μm);柱溫70℃保持3min,以5℃/min升至100℃,保留2min;進樣口溫120℃;檢測器溫(GC/FID)180℃;載氣(N2)97kpa;燃氣(H2)138kpa;助燃氣(空氣)207kpa;樣品溫80℃,樣品保溫平衡時間20~25min ,進樣增壓時間5s,柱分流比為10:1

l         回收率測定:取25μL苯類標(biāo)準(zhǔn)稀釋液兩份,一份加1.0mL生理鹽水即0.9%醫(yī)用鹽水,(做水中回收率),另一份加0.5mL生理鹽水和0.5g空白肝組織(做肝中回收率)



苯類化合物的回收率表

峰號  化合物名稱         回收率            標(biāo)準(zhǔn)偏差      變異系數(shù)

                                     水中       肝中          μL/mL             %

   2                 苯               91        88                2.4               1.1

   3               甲苯             96        93                4.9                2.2

   4              乙苯(內(nèi)標(biāo))   -          -            -              -

   5             間二甲苯       94        91               0.55               0.2

   6             對二甲苯       95        93               0.75              0.51  

   7             鄰二甲苯       102       100              5.85              2.6





l       線性范圍和相關(guān)系數(shù):分別取苯類標(biāo)準(zhǔn)稀釋液5、10、20、25、50μL五份,各加1mL生理鹽水,在相同前述條件下進行頂空色譜分析,苯、甲苯、乙苯(內(nèi)標(biāo))、二甲苯測得結(jié)果見圖,本實驗定量檢測限(μg/mL)苯為2、甲苯為10、二甲苯為30.。

l       鹽效應(yīng)篩選:取苯類標(biāo)準(zhǔn)稀釋液6份,每份25μL,分別加入1mL各5%NaCl、CuSO4、K2CO3、KAl(SO4)2、NaAc和生理鹽水,用內(nèi)標(biāo)計算結(jié)果KAl(SO4)2溶液使苯系列的活度系數(shù)相對增加較大,但考慮增加值相差不多,而生理鹽水的得到、使用、純度也合要求又方便,我們更喜歡用0.9% NaCl生理鹽水。

l       保溫時間對響應(yīng)的影響:取苯類標(biāo)準(zhǔn)稀釋液25μL共七份,各添加1mL生理鹽水,在樣品溫度80℃下,分別保溫時間為10、20、30、40、50、70min和480min,然后進樣內(nèi)標(biāo)計算結(jié)果20~30min為好,保溫480min之久的樣品,有許多組分已測不出來了。

l       同時做了二只體重2kg白兔實驗,使其空腹16h后,灌服苯類混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(苯:甲苯:二甲苯=5:10:15)30mL,10min后大小便失禁,30min內(nèi)再無其他癥狀變化,以后出現(xiàn)呼吸急促發(fā)顫,6h后擊腦處死,立即解剖進行分析,結(jié)果各臟器含量遞減順序如下:

苯——胃內(nèi)容→胃→血→肝→腦→肺→腸內(nèi)容→腎→膀胱→眼液→心→膽→腹肌肉→腿肌肉→大腸→脾;  

甲苯——胃內(nèi)容→腸內(nèi)容→胃→腦→肝→腎→膀胱→小腸→心→膽→大腸→腹肌肉→眼液→腿肌肉→脾

二甲苯——胃內(nèi)容→腸內(nèi)容→胃→腦→肝→膀胱→小腸→腎→大腸→心→膽→腹肌肉         

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